CLC-6 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405938-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CLC-6O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CLC-6 (h) e o Plasmídeo Double Nickase CLC-6 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CLCN6. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CLC-6 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405938-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CLC-6 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405938-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene humano **CLCN6** codifica a **CLC-6**, um trocador intracelular de cloreto/próton da família CLC que se localiza predominantemente em membranas endossomais e lisossomais. Ao acoplar o transporte de ânions à acidificação das organelas, a CLC-6 contribui para o tráfego endossomal, a reciclagem de receptores e a proteostase dependente de lisossomos, processos que se intersectam com a autofagia e com vias mais amplas de transporte vesicular. A perturbação da função de **CLCN6** tem sido associada a fenótipos do neurodesenvolvimento e a assinaturas de disfunção lisossomal, tornando-o relevante para estudos de homeostase neuronal e respostas ao estresse endolisossomal. A biologia da CLC-6 também é informativa em modelos que investigam a homeostase iônica, processos adjacentes à excitabilidade de membrana e a regulação do pH de organelas.
CLC-6 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CLCN6 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CLCN6. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CLCN6. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CLCN6 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.