claudin-7 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-424740-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- claudin-7O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase claudin-7 (m) e o Plasmídeo Double Nickase claudin-7 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Cldn7. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
claudin-7 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-424740-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
claudin-7 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-424740-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene murino **Cldn7** codifica a claudina-7, uma proteína tetraspanina das junções oclusivas (tight junctions) que ajuda a estabelecer a integridade da barreira epitelial e a polaridade ápico-basal ao regular a permeabilidade paracelular e a adesão célula–célula. A claudina-7 participa da montagem das junções oclusivas e da morfogênese epitelial, e pode influenciar redes de sinalização ligadas ao remodelamento juncional, incluindo vias que coordenam a organização do citoesqueleto e a migração celular. Alterações na expressão ou na localização de **CLDN7** têm sido associadas à displasia epitelial, a defeitos inflamatórios da barreira e a fenótipos de progressão tumoral em múltiplos tecidos, tornando-a um nó útil para estudar a estabilidade das junções e as transições de estado epitelial. Em modelos murinos, a perturbação de **Cldn7** permite investigar como componentes das junções oclusivas moldam a homeostase tecidual e as respostas ao microambiente.
claudin-7 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Cldn7 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Cldn7. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Cldn7. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Cldn7 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.