claudin-18 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404431
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- claudin-18 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico claudin-18, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
claudin-18 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404431 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
CLDN18 codifica a claudina-18, uma proteína tetraspan de junções oclusivas (tight junctions) que contribui para a função de barreira paracelular e para a polaridade epitelial em contextos específicos de tecido, incluindo os epitélios gástrico e pulmonar. Ao organizar as fitas de junções oclusivas em conjunto com outras claudinas e proteínas de andaime, como membros da família ZO, a claudina-18 ajuda a regular a integridade das junções, a seletividade iônica e a sinalização ligada à dinâmica do citoesqueleto. A expressão alterada de CLDN18 ou sua localização nas junções está associada ao remodelamento epitelial e à desregulação da homeostase da barreira, processos frequentemente conectados à inflamação e à biologia tumoral. CLDN18 também tem sido estudado no contexto de eventos de fusão e de programas de linhagem que afetam a adesão celular e estados de diferenciação.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO claudin-18 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CLDN18 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CLDN18, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CLDN18 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína claudin-18.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CLDN18 para a investigação da sinalização de claudin-18, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CLDN18 críticos para a função claudin-18
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CLDN18 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo claudin-18 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo claudin-18 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CLDN18. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo claudin-18 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR claudin-18 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CLDN18 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CLDN18 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.