claudin-18 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-404431

개요

CLDN18는 클라우딘-18(claudin-18)을 암호화하는 유전자로, 위와 폐 상피를 포함한 조직 특이적 맥락에서 세포 간(파라셀룰러) 장벽 기능과 상피 세포 극성 형성에 기여하는 4회 막관통형 타이트 정션 단백질입니다. 클라우딘-18은 다른 클라우딘들과 ZO 계열 단백질과 같은 스캐폴드 단백질과 함께 타이트 정션 스트랜드를 조직화함으로써, 접합부의 완전성, 이온 선택성, 그리고 세포골격 역학과 연계된 신호전달을 조절하는 데 도움을 줍니다. CLDN18의 발현 변화 또는 접합부 국소화의 이상은 상피 재형성과 장벽 항상성 조절 이상과 연관되며, 이러한 과정은 염증 및 종양 생물학과 연결되는 경우가 많습니다. 또한 CLDN18은 세포 부착과 분화 상태에 영향을 미치는 융합 사건(fusion events) 및 계통(lineage) 프로그램의 맥락에서도 연구되어 왔습니다.

claudin-18 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 CLDN18 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 CLDN18 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 CLDN18의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 claudin-18 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 claudin-18 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 CLDN18 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• claudin-18 기능에 중요한 CLDN18 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 CLDN18 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• claudin-18 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 claudin-18 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 CLDN18 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  claudin-18 HDR 플라스미드 (h) 및 claudin-18 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 CLDN18 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 CLDN18 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.