CHCHD3 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-425804

개요

Chchd3는 미토콘드리아 접촉 부위 및 크리스타 조직화 시스템(MICOS)의 핵심 구성 요소인 CHCHD3(또는 Mic19)를 암호화하며, 이는 미토콘드리아 내막의 구조와 크리스타 접합부(cristae junction)의 무결성을 유지합니다. CHCHD3는 크리스타 접합부에서 단백질 복합체가 형성·유지되도록 스캐폴드 역할을 하고, 미토콘드리아 역동성 및 단백질 수입 기구와 협력함으로써 산화적 인산화 효율, 호흡사슬의 조직화, 미토콘드리아 품질 관리를 뒷받침합니다. CHCHD3를 포함한 MICOS 구성 요소가 손상되면 생체에너지 대사의 변화, 활성산소(ROS) 증가와 함께, apoptosis(세포사멸), mitophagy(미토콘드리아 자가포식), 세포 스트레스 신호전달에 대한 하위 영향이 나타나는 것으로 알려져 있습니다. 이러한 과정은 미토콘드리아 초미세구조와 호흡이 핵심 표현형이 되는 신경퇴행, 심장·대사 기능 이상, 암세포의 대사 적응 모델에서 자주 분석됩니다.

CHCHD3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Chchd3 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Chchd3 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Chchd3의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 CHCHD3 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 CHCHD3 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Chchd3 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• CHCHD3 기능에 중요한 Chchd3 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Chchd3 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• CHCHD3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 CHCHD3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Chchd3 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  CHCHD3 HDR 플라스미드 (m) 및 CHCHD3 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Chchd3 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Chchd3 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.