CEPT1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-430281-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CEPT1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CEPT1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase CEPT1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Cept1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CEPT1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-430281-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CEPT1 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-430281-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O Cept1 murino codifica a colina/etanolamina fosfotransferase 1 (CEPT1), uma enzima de membrana do retículo endoplasmático que catalisa a etapa final da via de Kennedy, gerando fosfatidilcolina e fosfatidiletanolamina a partir de CDP-colina ou CDP-etanolamina e diacilglicerol. Ao controlar os principais reservatórios de glicerofosfolipídios, a CEPT1 sustenta a biogênese de membranas, a homeostase de organelas e processos de sinalização dependentes de lipídios que influenciam a proliferação, a diferenciação e respostas celulares ao estresse. A perturbação da síntese e do remodelamento de fosfolipídios é amplamente relevante para disfunções metabólicas, neurobiologia e transições de estado celular oncogênicas, tornando o Cept1 um ponto útil para investigar fenótipos impulsionados por lipídios em células de mamíferos. A função da CEPT1 também se conecta a vias que regulam a integridade do RE e a capacidade secretora, ligando a disponibilidade de lipídios à proteostase e ao tráfego de membranas.
CEPT1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Cept1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Cept1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Cept1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Cept1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.