CEACAM7 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-406726

Panoramica

CEACAM7 (molecola di adesione cellulare 7 correlata all’antigene carcinoembrionario) è un membro della superfamiglia delle immunoglobuline ancorato tramite GPI, implicato nell’adesione cellula–cellula omofilica ed eterofilica sulle superfici epiteliali. Attraverso interazioni che influenzano l’organizzazione della membrana e la segnalazione dipendente dal contatto, CEACAM7 contribuisce alla differenziazione epiteliale, alla polarità e ai processi associati alla funzione di barriera nei tessuti mucosali. Un’alterata espressione di CEACAM7 è stata associata al rimodellamento dell’epitelio e a cambiamenti legati ai tumori nei programmi di adesione e differenziazione, rendendolo un utile nodo molecolare per studiare i meccanismi che collegano l’adesione cellulare al controllo della crescita. Nella biologia del cancro e nella ricerca sull’epitelio mucosale, CEACAM7 viene spesso esaminato insieme ad altri membri della famiglia CEACAM per comprendere la compensazione di via e i fenotipi guidati dall’adesione.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO CEACAM7 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene CEACAM7 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del CEACAM7 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto CEACAM7 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina CEACAM7.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di CEACAM7 per lo studio della segnalazione di CEACAM7, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni CEACAM7 critici per la funzione di CEACAM7
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di CEACAM7 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal CEACAM7 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal CEACAM7 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus CEACAM7. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal CEACAM7 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR CEACAM7 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia CEACAM7 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio CEACAM7 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.