CDw75/ST6GAL1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402881-NIC

ST6GAL1 (CDw75) codifica a β-galactosídeo α-2,6-sialiltransferase 1, uma enzima localizada no complexo de Golgi que catalisa a sialilação terminal α2,6 de glicanos N-ligados em glicoproteínas de membrana e secretadas. Essa modificação influencia o dobramento de glicoproteínas, a estabilidade de receptores e o reconhecimento de ligantes, afetando interações célula–célula, modulação imune e transdução de sinais por meio de eventos de ligação dependentes de glicanos alterados. A atividade de ST6GAL1 contribui para a regulação dos glicomas de superfície de células B e epiteliais e impacta processos como adesão, migração e apoptose. A expressão desregulada de ST6GAL1 e padrões de α2,6-sialilação têm sido associados a alterações no comportamento de células tumorais, inflamação e suscetibilidade a infecções, tornando-o um nó-chave para pesquisas em glicobiologia e mecanismos de doença.

CDw75/ST6GAL1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ST6GAL1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ST6GAL1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ST6GAL1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ST6GAL1 interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.