CDK5RAP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-407278-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CDK5RAP1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CDK5RAP1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase CDK5RAP1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CDK5RAP1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CDK5RAP1 Anticorpo (D-1): sc-398764
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CDK5RAP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-407278-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CDK5RAP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-407278-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CDK5RAP1 (proteína 1 associada à subunidade regulatória CDK5) é uma enzima mitocondrial implicada na regulação pós-transcricional por meio da modificação de tRNAs, apoiando uma tradução mitocondrial eficiente e a fosforilação oxidativa. Ao modular a integridade da síntese proteica mitocondrial, a CDK5RAP1 influencia a bioenergética celular, o equilíbrio redox e vias de adaptação ao estresse. A perturbação da função de CDK5RAP1 tem sido associada a alterações na homeostase mitocondrial e é estudada em contextos nos quais a remodelação metabólica e a disfunção mitocondrial contribuem para a biologia de doenças, incluindo câncer e neurodegeneração. Como regulador associado às mitocôndrias, CDK5RAP1 oferece um ponto acessível para dissecar como a expressão gênica mitocondrial impacta o estado celular e a sobrevivência sob estresse.
CDK5RAP1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CDK5RAP1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CDK5RAP1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CDK5RAP1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CDK5RAP1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.