Cdk2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400111-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Cdk2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Cdk2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Cdk2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CDK2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Cdk2 Anticorpo (D-12): sc-6248
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Cdk2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400111-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Cdk2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400111-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CDK2 codifica a quinase dependente de ciclina 2 (Cdk2), uma quinase de serina/treonina que atua em parceria com as ciclinas E e A para coordenar a transição G1/S e a progressão pela fase S. A Cdk2 integra sinais mitogênicos com o disparo das origens de replicação, a duplicação do centrossomo e o controle de checkpoints do ciclo celular por meio da fosforilação de substratos no eixo RB–E2F e na maquinaria de replicação do DNA. Sua atividade é regulada por inibidores de CDK, como p21 e p27, e por fosforilação ativadora, conectando a CDK2 a respostas a dano ao DNA e estresse replicativo. A desregulação da sinalização de CDK2 é frequentemente associada a fenótipos proliferativos e a alterações na manutenção do genoma observadas na biologia do câncer e em sistemas modelo relacionados.
Cdk2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CDK2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CDK2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CDK2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CDK2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.