CDCP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-430933

概要

Cdcp1は、細胞表面に豊富に存在する一回膜貫通型糖タンパク質CDCP1をコードしており、接着応答性およびストレス応答性の経路における足場（スキャフォールド）兼シグナル統合ハブとして機能します。CDCP1はチロシンリン酸化を受け、SrcファミリーキナーゼやPKCシグナル伝達と連動することで、細胞骨格の再構築、細胞移動、生存、ならびに細胞外マトリックスとの相互作用に影響を与えます。マウス系では、Cdcp1の活性は上皮細胞および間質細胞の挙動、アノイキス抵抗性、そして状況依存的な浸潤性表現型の制御と関連づけられてきました。CDCP1シグナルの破綻（異常）は、腫瘍進展、転移関連プログラム、炎症性微小環境のモデルで頻繁に研究されており、機序解明のための経路解析において重要な標的となります。

CDCP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるCdcp1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Cdcp1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Cdcp1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CDCP1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CDCP1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Cdcp1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CDCP1の機能に不可欠なCdcp1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Cdcp1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CDCP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびCDCP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Cdcp1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CDCP1 HDRプラスミド（m）および CDCP1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCdcp1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCdcp1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。