Date published: 2026-7-11

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CD88 CRISPR/Cas9 KO质粒 (m): sc-419395

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说明书
  • 针对种属:mouse
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • CD88 CRISPR/Cas9 基因敲除(KO)质粒(m) 是一组质粒混合物,每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA(gRNA),其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列,旨在实现最高的基因敲除效率
  • gRNA序列引导Cas9在CD88基因组位点诱导位点特异性双链断裂(DSBs),从而通过非同源末端连接(NHEJ)实现基因敲除
  • 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点,因此在建立稳定的基因敲除细胞系后,可以通过 Cre 重组酶(Cre 向量:sc-418923)去除选择标记。
  • 转染后,基因敲除效率可以用抗体:CD88: sc-53797,通过WB, IF或者IHC分析
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    CD88 CRISPR/Cas9 KO质粒 (m)

    sc-419395
    20 µg
    $397.00

    概述

    C5ar1 编码 CD88,这是补体过敏毒素 C5a 的经典 G 蛋白偶联受体,并在髓系细胞(包括中性粒细胞、单核细胞和巨噬细胞)中高表达。配体结合后,CD88 激活 Gi 依赖性信号传导,驱动趋化、钙离子动员、MAPK 和 PI3K 通路、氧化爆发以及细胞因子产生,将补体信号与先天免疫激活整合起来。该受体参与炎症放大与白细胞募集,并与 Fc 受体信号及模式识别通路发生交叉,共同塑造组织损伤与修复反应。C5a–CD88 信号失调已在脓毒症、自身免疫性炎症、缺血再灌注损伤和神经炎症等模型中被认为与发病相关,使 C5ar1 成为免疫病理机制研究的一个有用节点。

    CD88 CRISPR/Cas9 KO质粒(m)是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中C5ar1基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA(sgRNA),该sgRNA针对C5ar1基因内的特定位点,并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP,可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。

    多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后,产生破坏C5ar1开放阅读框的插入或缺失(indels)的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接(NHEJ)途径修复,通常会导致移码突变,从而使CD88蛋白表达失活。

    该CRISPR敲除系统能够高效构建C5ar1缺失的细胞模型,用于CD88信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。

    主要特点

    • 针对对 CD88 功能至关重要的 C5ar1 外显子的 sgRNA
      通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
      GFP 报告基因用于识别转染细胞
      针对多个 C5ar1 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
      兼容转染递送

    设计变体

    CRISPRs +/- HDR

    • 由 CD88 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 CD88 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 C5ar1 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
      由 CD88 HDR 质粒(m)编码的 HDR 供体构建体以及 CD88 HDR质粒(m2)编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因,其两侧由C5ar1同源臂包围,以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定C5ar1靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。