CD72 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404054-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CD72O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CD72 (h) e o Plasmídeo Double Nickase CD72 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CD72. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CD72 Anticorpo (G-5): sc-25265
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CD72 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404054-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CD72 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404054-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CD72 é uma glicoproteína transmembranar do tipo II restrita a células B, que atua como um correceptor imunorregulador, acoplando os sinais do receptor de antígeno a vias inibitórias intracelulares. Por meio da fosforilação do motivo inibitório baseado em tirosina de receptores imunológicos (ITIM) e do recrutamento de fosfatases como SHP-1/SHIP, o CD72 modula os limiares de ativação induzidos pelo BCR, o fluxo de cálcio e a sinalização a jusante de MAPK e PI3K. O CD72 também se liga ao ligante da família das semaforinas SEMA4D (CD100), influenciando as interações entre células B e T, as respostas do centro germinativo e a tolerância periférica. A desregulação da sinalização do CD72 tem sido associada a alterações na homeostase de células B e à autoimunidade, e sua expressão e o contexto de suas vias são frequentemente investigados na biologia das neoplasias de células B e em estudos do microambiente imune.
CD72 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CD72 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CD72. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CD72. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CD72 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.