CD36 Plasmide Double Nickase (h): sc-400233-NIC

CD36 codifica un recettore scavenger multifunzionale di classe B, espresso su macrofagi, adipociti, cellule endoteliali e piastrine, che lega acidi grassi a catena lunga, fosfolipidi ossidati e trombospondina-1. Attraverso la regolazione dell'assorbimento dei lipidi e del traffico intracellulare, CD36 si integra con la segnalazione metabolica, i programmi infiammatori e il riconoscimento innato dei pattern immunitari, includendo vie associate alla formazione di cellule schiumose e alle risposte allo stress ossidativo. Il sensing dei ligandi dipendente da CD36 modella la polarizzazione dei macrofagi e l'omeostasi vascolare, rendendolo un nodo chiave negli studi sulla biologia dell'aterosclerosi, la resistenza all'insulina e il rimodellamento tissutale associato all'infiammazione. Alterazioni dell'espressione o dell'attività di CD36 sono state inoltre collegate all'attivazione piastrinica e alla disfunzione microvascolare, a supporto della sua ampia rilevanza nella ricerca cardiometabolica e immunometabolica.

CD36 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CD36 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CD36. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CD36. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CD36 interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.