CD35 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-401210

概要

CR1はCD35（補体受容体1）をコードしており、C3b/C4bオプソニンに結合する膜結合型の補体受容体である。CD35は免疫複合体のクリアランスを促進するとともに、細胞表面での補体活性化を制御する。さらにCD35は自然免疫における認識に関与し、抗原の取り扱いおよびB細胞シグナル伝達を調節することで、補体系を獲得免疫応答へと結び付ける。発現は赤血球、白血球、ならびに濾胞樹状細胞に認められる。補体カスケードの増幅および貪食取り込みの制御を通じて、CR1は炎症の恒常性や、補体介在性の組織障害に対する感受性に影響を与える。遺伝的多型やCR1/CD35発現の変化は、免疫調節異常や炎症性疾患との関連が報告されており、神経炎症や感染症における宿主—病原体相互作用といった文脈でも研究されている。

CD35 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCR1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CR1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CR1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CD35タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CD35シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CR1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CD35の機能に不可欠なCR1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CR1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CD35 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびCD35 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CR1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CD35 HDRプラスミド（h）および CD35 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCR1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCR1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。