CD34 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400197-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CD34O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CD34 (h) e o Plasmídeo Double Nickase CD34 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CD34. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CD34 Anticorpo (B-6): sc-74499
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CD34 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400197-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CD34 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400197-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CD34 é uma glicoproteína transmembranar do tipo sialomucina, amplamente utilizada como marcador de células-tronco e progenitoras hematopoéticas humanas, e também é expressa no endotélio vascular e em populações estromais selecionadas. Ela contribui para a adesão e o tráfego celulares ao modular interações com selectinas e componentes da matriz extracelular, influenciando migração, homing e retenção no nicho. Por meio de efeitos sobre a organização da membrana e a sinalização na superfície celular, o CD34 está associado a processos que regulam o desenvolvimento hematopoético, a biologia endotelial e o recrutamento de células inflamatórias. Padrões alterados de expressão de CD34 são relevantes para estudos de neoplasias hematológicas, remodelamento vascular e dinâmica de células-tronco em modelos de doença.
CD34 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CD34 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CD34. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CD34. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CD34 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.