CD30 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402068-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CD30O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CD30 (h) e o Plasmídeo Double Nickase CD30 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para TNFRSF8. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CD30 Anticorpo (C-3): sc-46683
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CD30 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402068-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CD30 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402068-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TNFRSF8 codifica o CD30, um membro da superfamília de receptores de TNF expresso em linfócitos T e B ativados, que atua como um receptor coestimulatório induzível. O engajamento do CD30 promove o recrutamento de adaptadores TRAF e a ativação a jusante das vias de sinalização NF-κB, MAPK/ERK e JNK, modulando a produção de citocinas, a proliferação e a morte celular induzida por ativação, dependendo do contexto celular. A desregulação da sinalização e da expressão de CD30 está intimamente associada a estados de ativação linfoide e é amplamente estudada no linfoma de Hodgkin e no linfoma de grandes células anaplásicas como marcador de programas alterados de sinalização imune. Como receptor de superfície celular que integra sinais inflamatórios, o CD30 também é relevante para investigações sobre interações no microambiente imune e reprogramação transcricional em linfócitos malignos e ativados.
CD30 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TNFRSF8 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TNFRSF8. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TNFRSF8. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TNFRSF8 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.