CD30 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423446
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CD30 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CD30, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CD30 Anticorpo (C-3): sc-46683
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CD30 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423446 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene Tnfrsf8 de camundongo codifica o CD30, um membro da superfamília de receptores de TNF expresso em linfócitos ativados, que transmite sinais por meio de proteínas adaptadoras como as TRAFs para modular a atividade das vias de NF-κB e MAPK. A sinalização dependente de CD30 influencia programas de ativação de células T e B, a produção de citocinas e decisões de sobrevivência que moldam a homeostase imune. Em modelos murinos, alterações na função do CD30 têm sido usadas para investigar mecanismos de diferenciação de linfócitos, regulação imune e inflamação em tecidos linfoides. Vias associadas ao CD30 desreguladas são relevantes para estudos de ativação imune aberrante e fenótipos linfoproliferativos, reforçando sua utilidade como um nó genético para pesquisa em imunologia.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CD30 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Tnfrsf8 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Tnfrsf8, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Tnfrsf8 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CD30.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Tnfrsf8 para a investigação da sinalização de CD30, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Tnfrsf8 críticos para a função CD30
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Tnfrsf8 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CD30 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo CD30 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Tnfrsf8. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CD30 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR CD30 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Tnfrsf8 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Tnfrsf8 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.