CD28 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419541
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CD28 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CD28, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CD28 Anticorpo (3H1179): sc-70612
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CD28 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419541 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Cd28 codifica o CD28, um receptor coestimulatório essencial em células T que potencializa a sinalização do TCR para sustentar a ativação completa, a produção de IL-2, a proliferação e a sobrevivência. A ligação do CD28 ao CD80/CD86 em células apresentadoras de antígeno ativa os programas PI3K–AKT–mTOR e de transcrição via NF-κB/AP-1, moldando a diferenciação efetora e a reprogramação metabólica. Ao definir limiares de ativação e promover a homeostase de células T reguladoras, o CD28 influencia a tolerância periférica, a inflamação crônica e fenótipos de desregulação imune observados em modelos murinos de autoimunidade e infecção. A sinalização alterada de CD28 também é relevante para estudos de evasão imune tumoral e de imunopatologia que investigam redes de checkpoints e de coestimulação.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CD28 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Cd28 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Cd28, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Cd28 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CD28.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Cd28 para a investigação da sinalização de CD28, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Cd28 críticos para a função CD28
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Cd28 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CD28 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo CD28 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Cd28. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CD28 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR CD28 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Cd28 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Cd28 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.