CD21 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-419789

概要

Cr2はCD21（補体受容体2）をコードしており、B細胞および濾胞樹状細胞に高発現する細胞表面受容体である。CD21はC3dなどの補体断片に結合し、B細胞受容体の活性化閾値を下げるとともに、抗原の保持を促進する。CD21はCD19–CD81からなる共受容体複合体の一部として機能し、PI3K–AKTやMAPKなどの経路を介したシグナル伝達を増幅することで、胚中心反応、クラススイッチ組換え、記憶B細胞形成を支える。マウス免疫学においてCr2/CD21は、補体により駆動される液性免疫および免疫複合体の処理の中核を担うため、B細胞活性化の制御破綻、自己抗体産生、ならびに病原体に対する宿主応答の変化を扱う研究に関連が深い。

CD21 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるCr2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Cr2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Cr2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CD21タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CD21シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Cr2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CD21の機能に不可欠なCr2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Cr2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CD21 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびCD21 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Cr2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CD21 HDRプラスミド（m）および CD21 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCr2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCr2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。