Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
CD21 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419789
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- CD21 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico CD21, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CD21 Anticuerpo (A-3): sc-13135
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
CD21 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419789 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Cr2 codifica CD21 (receptor del complemento 2), un receptor de superficie altamente expresado en células B y células dendríticas foliculares que se une a fragmentos del complemento como C3d para reducir el umbral de activación del receptor de la célula B y favorecer la retención de antígenos. CD21 funciona dentro del complejo correceptor CD19–CD81 para amplificar la señalización a través de vías como PI3K–AKT y MAPK, apoyando las respuestas del centro germinal, la recombinación de cambio de clase y la formación de células B de memoria. En inmunología del ratón, Cr2/CD21 es fundamental para la inmunidad humoral impulsada por el complemento y el manejo de complejos inmunes, por lo que resulta relevante para estudios sobre activación desregulada de células B, generación de autoanticuerpos y respuestas del huésped alteradas frente a patógenos.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO CD21 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Cr2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Cr2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Cr2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CD21.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Cr2 para la investigación de la señalización de CD21, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Cr2 críticos para la función de CD21
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Cr2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido CD21 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido CD21 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Cr2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CD21 (m) y el plásmido HDR CD21 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Cr2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Cr2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.