Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CD1A Plasmide Double Nickase (h): sc-401734-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CD1A Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CD1A Double Nickase Plasmid (h) e il CD1A Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CD1A. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: CD1A Antibody (O10): sc-18885
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CD1A Plasmide Double Nickase (h) | sc-401734-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CD1A Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401734-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CD1A codifica una glicoproteina non classica simile alle molecole MHC di classe I, espressa principalmente sulle cellule dendritiche e sulle cellule di Langerhans, dove presenta ai linfociti T antigeni lipidici e glicolipidici. Legando ligandi lipidici endogeni e microbici e interagendo con specifici recettori dei linfociti T, CD1A contribuisce alla sorveglianza immunitaria antigene-specifica e a modellare le risposte immunitarie cutanee e mucosali. La presentazione lipidica dipendente da CD1A si intreccia con il traffico endocitico, il processamento dell’antigene e i programmi di differenziazione guidati dalle citochine nelle cellule presentanti l’antigene. Alterazioni dell’espressione o della funzione di CD1A sono state associate a patologie infiammatorie della pelle, infiammazione allergica e microambienti immunitari tumorali, rendendolo un bersaglio utile per studi di immunologia meccanicistica.
CD1A Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CD1A nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CD1A. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CD1A. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CD1A interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.