Ccr1l1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-419703

概要

Ccr1l1 は、CCR1 に類似したケモカイン受容体関連タンパク質をコードしており、G タンパク質共役型受容体（GPCR）によって制御されることの多いケモカイン軸に基づく白血球トラフィッキングや炎症性シグナル伝達ネットワークに関与すると予測されています。典型的な CCR ファミリー分子ほど詳細には解析されていないものの、Ccr1l1 はケモカイン誘導性の遊走、免疫細胞の局在、ならびにアクチン再構築やサイトカイン／ケモカイン回路の制御に結び付く下流経路に影響を与え得る位置づけにあります。これらの過程は自然免疫および獲得免疫応答の中核であり、炎症性疾患、感染症、腫瘍—免疫微小環境ダイナミクスのモデルでもしばしば関与が示されています。したがって、マウス Ccr1l1 は、in vivo および初代細胞システムにおいて、ケモカイン受容体近傍の生物学や免疫調節機構を検討するための有用な入口となります。

Ccr1l1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるCcr1l1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Ccr1l1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Ccr1l1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Ccr1l1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Ccr1l1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Ccr1l1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Ccr1l1の機能に不可欠なCcr1l1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Ccr1l1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Ccr1l1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびCcr1l1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Ccr1l1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Ccr1l1 HDRプラスミド（m）および Ccr1l1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCcr1l1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCcr1l1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。