Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
cathepsin D Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419875
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- cathepsin D O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico cathepsin D, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:cathepsin D Anticorpo (D-7): sc-377299
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
cathepsin D Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419875 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene **Ctsd** do camundongo codifica a **catepsina D**, uma endopeptidase aspártica lisossomal central para a renovação intracelular de proteínas e para a homeostase endolisossomal. A catepsina D participa do fluxo autofágico, da degradação mediada por lisossomos e do processamento de peptídeos bioativos, influenciando assim o processamento de antígenos e redes mais amplas de proteostase. A atividade alterada de **CTSD** está associada à disfunção lisossomal, à vulnerabilidade neuronal e à modulação da sinalização inflamatória, tornando-a relevante para estudos de neurodegeneração e respostas ao estresse metabólico. Em modelos celulares e animais, **Ctsd** também é utilizado para investigar a comunicação cruzada entre a função lisossomal, a apoptose e vias de controle de qualidade mitocondrial.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO cathepsin D (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ctsd em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ctsd, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ctsd na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína cathepsin D.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ctsd para a investigação da sinalização de cathepsin D, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ctsd críticos para a função cathepsin D
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ctsd para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo cathepsin D Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo cathepsin D Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ctsd. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo cathepsin D Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR cathepsin D (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ctsd para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ctsd definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.