CAT Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404860-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CATO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CAT (h) e o Plasmídeo Double Nickase CAT (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CRAT. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CAT Anticorpo (654D2Y): sc-517650
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CAT Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404860-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CAT Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404860-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CRAT codifica a carnitina O-acetiltransferase (CAT), uma enzima da matriz mitocondrial que catalisa a transferência reversível de grupos acetil entre acetil-CoA e carnitina, formando acetilcarnitina. Essa reação conecta a β-oxidação de ácidos graxos, o uso de acetil-CoA derivado do piruvato e a manutenção dos estoques mitocondriais de CoA, influenciando assim o balanço redox e a flexibilidade metabólica. Ao modular o tamponamento de grupos acetil e os perfis de acilcarnitinas, a CAT contribui para a regulação do metabolismo energético durante mudanças de disponibilidade de nutrientes e situações de estresse. Fluxo de acetil dependente de carnitina desregulado e acúmulo de acilcarnitinas são leituras bioquímicas amplamente usadas em estudos de síndrome metabólica, resistência à insulina e disfunção mitocondrial, tornando o CRAT um ponto útil para investigação mecanística.
CAT O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CRAT em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CRAT. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CRAT. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CRAT interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.