CapZ-α1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405348

概要

CAPZA1は、アクチンフィラメントキャッピングタンパク質CapZのα1サブユニットをコードしている。CapZはヘテロ二量体で、F-アクチンのプラス端（barbed end）に結合し、フィラメントの伸長、ターンオーバー、およびネットワーク構造を調節する。CapZ-α1はアクチンダイナミクスを制御することで、細胞形態・接着・運動性を支える細胞骨格リモデリングに寄与し、さらにアクチン構築やメカノトランスダクションに関連するシグナル伝達経路とも連携する。アクチンのキャッピング制御やそれに伴う細胞骨格プログラムの調節異常は、腫瘍細胞の浸潤、心筋細胞の構造と収縮能、その他アクチン依存的なリモデリングが細胞挙動の重要な規定因子となる状況に関連する表現型に、しばしば関与している。

CapZ-α1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCAPZA1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CAPZA1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CAPZA1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CapZ-α1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CapZ-α1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CAPZA1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CapZ-α1の機能に不可欠なCAPZA1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CAPZA1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CapZ-α1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびCapZ-α1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CAPZA1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CapZ-α1 HDRプラスミド（h）および CapZ-α1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCAPZA1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCAPZA1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。