Calgranulin B CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-400801

概要

S100A9はカルグラヌリンBをコードしており、カルグラヌリンBはカルシウム結合性をもつS100ファミリーのタンパク質で、S100A8とヘテロ二量体を形成し、好中球および炎症性単球に豊富に発現します。カルグラヌリンBは、TLR4やRAGEなどのパターン認識受容体との相互作用を介して自然免疫シグナル伝達と白血球のトラフィッキングを調節し、NF-κB/MAPKにより駆動されるサイトカイン／ケモカイン産生プログラムを増幅します。また、抗菌応答、酸化ストレス制御、骨髄系細胞の活性化に寄与し、急性および慢性炎症のマーカー／メディエーターとして頻繁に研究されています。S100A9の発現異常は、炎症性疾患やがん関連の骨髄系プログラムと関連づけられており、腫瘍微小環境における免疫抑制性骨髄系集団のリクルートや機能的極性化（ポラライゼーション）も含まれます。

Calgranulin B CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるS100A9遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、S100A9内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、S100A9のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Calgranulin Bタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Calgranulin Bシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、S100A9欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Calgranulin Bの機能に不可欠なS100A9エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、S100A9ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Calgranulin B CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびCalgranulin B CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、S100A9遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Calgranulin B HDRプラスミド（h）および Calgranulin B HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはS100A9ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のS100A9標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。