CALCOCO2 Plasmide Double Nickase (h): sc-416970-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CALCOCO2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CALCOCO2 Double Nickase Plasmid (h) e il CALCOCO2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CALCOCO2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: CALCOCO2 Antibody (F-6): sc-376540
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CALCOCO2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-416970-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CALCOCO2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-416970-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CALCOCO2 (nota anche come NDP52) è un recettore di autofagia selettiva che collega il carico ubiquitinato all’autofagosoma tramite interazioni con la famiglia LC3/GABARAP, coordinando xenofagia, mitofagia e il turnover degli aggregati proteici. Agisce all’interfaccia tra la segnalazione dell’immunità innata e il traffico di membrana, operando a valle di vie di riconoscimento dipendenti dall’ubiquitina e contribuendo alla restrizione dei patogeni e al controllo dell’infiammazione. CALCOCO2 partecipa alla dinamica delle vescicole e a reti di risposta allo stress che modellano l’omeostasi cellulare, includendo il crosstalk con la segnalazione associata a NF-κB e con l’organizzazione del citoscheletro. La disregolazione dell’autofagia mediata da CALCOCO2 e della sorveglianza immunitaria è stata studiata in contesti quali la biologia delle infezioni, fenotipi infiammatori e programmi di sopravvivenza cellulare legati al cancro.
CALCOCO2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CALCOCO2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CALCOCO2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CALCOCO2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CALCOCO2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.