cadherin-19 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-401716

概要

CDH19 は、カルシウム依存性の細胞間接着分子であるカドヘリン19をコードしており、組織構築や接触依存的シグナル伝達に寄与します。古典的カドヘリンファミリーの一員として、カドヘリン19はカテニンとの相互作用およびアクチン細胞骨格への連結を介して接着結合（adherens junction）の構築を支え、細胞極性、遊走、分化といった過程に影響を与えます。CDH19 の発現は神経系およびグリア系統で報告されており、カドヘリン介在性の接着が発生過程のパターニングや細胞間相互作用を形作る可能性があります。疾患の文脈では、カドヘリン発現の異常や接着結合のリモデリングが、浸潤性や系譜アイデンティティの変化と関連することが多く、CDH19 は接着依存的な表現型を研究するうえで有用な標的となります。

cadherin-19 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCDH19遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CDH19内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CDH19のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、cadherin-19タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、cadherin-19シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CDH19欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• cadherin-19の機能に不可欠なCDH19エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CDH19ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• cadherin-19 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびcadherin-19 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CDH19遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  cadherin-19 HDRプラスミド（h）および cadherin-19 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCDH19ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCDH19標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。