Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CAD Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403028-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CADO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CAD (h) e o Plasmídeo Double Nickase CAD (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para DFFB. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CAD Anticorpo (F-11): sc-374067
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CAD Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403028-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CAD Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403028-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O DFFB codifica a CAD (DNase ativada por caspases), a endonuclease responsável pela fragmentação internucleossômica do DNA durante a apoptose. Em células saudáveis, a atividade da CAD é contida pelo seu inibidor ICAD (DFFA) até que a clivagem de ICAD dependente de caspases libere a CAD para clivar a cromatina, conectando a sinalização apoptótica ao desmantelamento nuclear. Esse processo se cruza com vias da cascata de caspases, a organização da cromatina e a remoção de células moribundas, sendo comumente usado como um marcador molecular de morte celular programada. A regulação alterada da fragmentação do DNA mediada por CAD tem sido associada a fenótipos apoptóticos aberrantes e defeitos na integridade do genoma, sustentando sua relevância em estudos de biologia do câncer, homeostase imunológica e neurodegeneração.
CAD O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DFFB em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DFFB. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DFFB. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DFFB interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.