C/EBP δ Double Nickaseプラスミド (h): sc-400772-NIC

CEBPD は転写因子 C/EBPδ をコードしており、C/EBPδ は塩基性ロイシンジッパー型タンパク質として、炎症シグナル伝達、急性期応答、ならびにストレス誘導性の増殖制御を担う遺伝子発現プログラムを調節します。C/EBPδ は IL-6/JAK–STAT や NF-κB 関連ネットワークを含む、サイトカインおよび自然免疫経路からのシグナルを統合し、複数の細胞種における分化や代謝適応にも寄与します。その活性は、下流エフェクターの転写制御を介して細胞周期制御、アポトーシス、細胞老化に影響を与えます。CEBPD の発現またはシグナル伝達の破綻は、慢性炎症や腫瘍生物学の文脈と関連づけられており、免疫学およびがん研究における機構的ハブとしての有用性を支持しています。

C/EBP δ ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における CEBPD 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、CEBPD内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、CEBPDの機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。

編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、CEBPDが破壊されたクローンの検証が簡素化されます。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。