BVES CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-403698

概要

血管心外膜由来物質（BVES、別名POPDC1）は、横紋筋および上皮組織に多く発現する膜結合型タンパク質で、細胞間接着や上皮極性の維持に寄与します。BVESは、cAMP結合、膜輸送、細胞骨格の構築に関連するシグナル伝達ネットワークに関与し、接着結合の完全性と組織構築の協調を助けます。BVESの発現量や局在の変化は、バリア機能の破綻や異常な細胞移動と関連づけられており、上皮間葉転換（EMT）や組織リモデリングの研究において重要です。がん生物学および心血管研究では、BVESが正常な細胞構造の維持や、増殖・運動性に影響する経路における役割の観点から、しばしば解析対象となっています。

BVES CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるBVES遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、BVES内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、BVESのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、BVESタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、BVESシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、BVES欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• BVESの機能に不可欠なBVESエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、BVESゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• BVES CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびBVES CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、BVES遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  BVES HDRプラスミド（h）および BVES HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはBVESホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のBVES標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。