Btk Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400603-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- BtkO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Btk (h) e o Plasmídeo Double Nickase Btk (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para BTK. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Btk Anticorpo (E-9): sc-28387
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Btk Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400603-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Btk Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400603-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
A tirosina quinase de Bruton (BTK; Btk) é uma quinase da família Tec não associada a receptor que transmite sinais a jusante do receptor de células B e de múltiplos imunorreceptores, acoplando entradas de ativação à fosfolipase Cγ2, ao fluxo de cálcio e às vias de sinalização MAPK, PI3K–AKT e NF-κB. Em células hematopoéticas humanas, a BTK ajuda a coordenar o desenvolvimento de células B, a ativação dirigida por antígeno, a produção de citocinas e respostas de receptores da imunidade inata em linhagens mieloides. A desregulação da sinalização de BTK está implicada em disfunção imune e contribui para programas patogênicos de sobrevivência e ativação em diversas neoplasias de células B, tornando-a um alvo amplamente utilizado em estudos mecanísticos da sinalização linfocitária. A BTK também se integra a vias que controlam adesão e migração celular, sustentando pesquisas sobre o tráfego de células imunes e interações com o microambiente.
Btk O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus BTK em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de BTK. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função BTK. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com BTK interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.