BTG1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-405339

Panoramica

BTG1 (B-cell translocation gene 1) codifica un regolatore antiproliferativo che modula la progressione del ciclo cellulare e la quiescenza cellulare, con ruoli di rilievo nella differenziazione ematopoietica e nell’omeostasi linfoide. La proteina BTG1 agisce come coregolatore trascrizionale e si interfaccia con il macchinario di deadenilazione dell’mRNA (complesso CCR4–NOT) attraverso interazioni con fattori quali CAF1/CNOT7, contribuendo a modellare la stabilità dei trascritti e i programmi di espressione genica. Tramite queste attività, BTG1 influenza output di segnalazione legati alle risposte allo stress e ai checkpoint dello sviluppo, incluse vie che regolano proliferazione, apoptosi e differenziamento. Alterazioni dell’espressione di BTG1 o lesioni genetiche sono ricorrentemente associate alla biologia delle neoplasie linfoidi e ai fenotipi di risposta al trattamento, rendendolo un bersaglio utile per studi meccanicistici su processi di tipo oncosoppressivo e sul controllo trascrizionale.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO BTG1 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene BTG1 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del BTG1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto BTG1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina BTG1.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di BTG1 per lo studio della segnalazione di BTG1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni BTG1 critici per la funzione di BTG1
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di BTG1 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal BTG1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal BTG1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus BTG1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal BTG1 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR BTG1 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia BTG1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio BTG1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.