BTG1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405339
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- BTG1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico BTG1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:BTG1 Anticorpo (2095C1a): sc-81207
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
BTG1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405339 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
BTG1 (gene de translocação de célula B 1) codifica um regulador antiproliferativo que modula a progressão do ciclo celular e a quiescência celular, com papéis de destaque na diferenciação hematopoética e na homeostase linfoide. A proteína BTG1 atua como um correagulador transcricional e se conecta à maquinaria de deadenilação de mRNA (complexo CCR4–NOT) por meio de interações com fatores como CAF1/CNOT7, moldando a estabilidade dos transcritos e programas de expressão gênica. Por meio dessas atividades, BTG1 influencia saídas de sinalização ligadas a respostas ao estresse e a checkpoints do desenvolvimento, incluindo vias que governam proliferação, apoptose e diferenciação. A expressão alterada de BTG1 ou lesões genéticas estão recorrentemente associadas à biologia de neoplasias linfoides e a fenótipos de resposta ao tratamento, tornando-o um alvo útil para estudos mecanísticos de processos semelhantes aos de supressores tumorais e de controle transcricional.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO BTG1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene BTG1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do BTG1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do BTG1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína BTG1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de BTG1 para a investigação da sinalização de BTG1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) BTG1 críticos para a função BTG1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos BTG1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo BTG1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo BTG1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus BTG1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo BTG1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR BTG1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia BTG1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo BTG1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.