beta Arrestin 1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-430955-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- beta Arrestin 1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase beta Arrestin 1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase beta Arrestin 1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Arrb1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:beta Arrestin 1 Anticorpo (25-G10): sc-53780
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
beta Arrestin 1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-430955-NIC | 20 µg | $410.00 |
O gene Arrb1 de camundongo codifica a beta-arrestina 1, um adaptador multifuncional que regula a dessensibilização, a internalização e o tráfego de receptores acoplados à proteína G (GPCR), além de atuar como plataforma (scaffold) para complexos de sinalização. Para além do desacoplamento clássico do receptor, a beta-arrestina 1 coordena cascatas de quinases, incluindo MAPK/ERK, e pode influenciar a sinalização PI3K–AKT e NF-κB, conectando a atividade de receptores de membrana a respostas transcricionais e do citoesqueleto. Por meio dessas interações entre vias, Arrb1 contribui para o controle da migração celular, da sinalização inflamatória e da responsividade dos sistemas neuronal e imune. Alterações na sinalização dependente de arrestinas têm sido associadas a redes desreguladas de sinalização de receptores relevantes para a biologia do câncer, a regulação metabólica e processos neuroinflamatórios, tornando Arrb1 um nó útil para investigação de vias em modelos murinos.
beta Arrestin 1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Arrb1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Arrb1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Arrb1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Arrb1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.