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BECN1/Beclin-1双切口酶质粒(m) | sc-425033-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
BECN1/Beclin-1双切口酶质粒(m2) | sc-425033-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
小鼠 Becn1 编码 BECN1/Beclin-1(Beclin-1),是宏自噬的核心调控因子。它通过促进 PI3KC3/VPS34 复合体的组装,并在新生吞噬泡(phagophore)处生成磷脂酰肌醇-3-磷酸(PI3P),从而协调自噬体的起始。Beclin-1 通过与 BCL2 家族蛋白及多种自噬调节因子相互作用,整合营养与应激信号,进而影响细胞器质量控制、蛋白质稳态以及先天免疫反应。通过这些通路,BECN1 将自噬与细胞稳态相关程序(包括内体-溶酶体运输和选择性自噬)连接起来;这些过程常在神经退行性疾病、感染生物学、代谢应激以及肿瘤相关模型中被研究。
BECN1/Beclin-1 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Becn1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Becn1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Becn1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Becn1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。