Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
BANP Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-412401
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- BANP Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico BANP, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: BANP Antibody (1524CT337.6.32): sc-517314
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
BANP Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-412401 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
BANP (proteina nucleare associata a BTG3), nota anche come SMAR1, è un fattore nucleare legante il DNA implicato nell’organizzazione della cromatina e nel controllo trascrizionale nelle regioni di ancoraggio alla matrice. È stata collegata alla regolazione della progressione del ciclo cellulare, alle risposte dei checkpoint e al mantenimento della stabilità del genoma attraverso il coordinamento di programmi trascrizionali e di processi associati al danno al DNA. L’attività di BANP si interseca con il rimodellamento della cromatina e con reti di segnalazione associate ai soppressori tumorali, influenzando la proliferazione e l’espressione genica indotta dallo stress. La disregolazione dell’espressione o della funzione di BANP è stata associata ad alterazioni del controllo della crescita e a fenotipi di integrità genomica rilevanti per la biologia del cancro e per modelli cellulari correlati.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO BANP (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene BANP in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del BANP insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto BANP a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina BANP.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di BANP per lo studio della segnalazione di BANP, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni BANP critici per la funzione di BANP
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di BANP per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal BANP CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal BANP CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus BANP. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal BANP Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR BANP (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia BANP per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio BANP definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.