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B-ATF慢病毒激活颗粒(h2) | sc-401553-LAC-2 | 200 µl | $455.00 |
人类BATF基因编码B-ATF,这是一种AP-1网络中的碱性亮氨酸拉链(bZIP)转录因子,能够与JUN蛋白形成异源二聚体,并在AP-1样位点及复合AICE/IRF元件上调控DNA结合,从而塑造情境特异性的基因表达程序。BATF是免疫细胞分化与效应功能的核心调控因子,影响辅助性T细胞(Th)和滤泡辅助性T细胞(Tfh)的谱系决定、生发中心反应,以及TCR激活和IL-21/STAT依赖的转录调控等通路下游由细胞因子驱动的信号传导。BATF活性失衡及其相关转录回路与免疫介导的炎症、自身免疫以及血液系统恶性肿瘤中的致癌性转录状态有关,因此成为研究免疫调控机制的有用靶点。对BATF进行基因编辑可支持多种功能基因组学应用,包括扰动AP-1/IRF协同作用、绘制增强子使用与染色质重塑图谱,以及在工程化人类细胞模型中解析免疫信号网络。
B-ATF 慢病毒激活颗粒(h2)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 BATF 表达。
B-ATF 慢病毒激活颗粒(h2)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在BATF转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性B-ATF表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 BATF 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。