AT_1a CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-419048

개요

Agtr1a는 마우스의 안지오텐신 II 1형 A 수용체(AT1a)를 암호화하며, 혈관·신장·심장·신경 조직에서 안지오텐신 II 신호전달을 매개하는 7회 막관통 GPCR입니다. 리간드가 결합하면 AT1a는 주로 Gq/11과 결합해 포스포리파아제 C를 활성화하고, 세포내 Ca2+를 증가시키며, PKC 의존적 신호를 촉진합니다. 또한 MAPK/ERK 연쇄반응과 β-아레스틴 연관 경로도 활성화하여 전사 프로그램에 영향을 줍니다. 이 수용체는 레닌–안지오텐신 시스템의 입력을 혈관운동 조절, 나트륨·체액 처리, 산화 스트레스 반응, 염증성 신호전달 등 다양한 세포 과정과 통합합니다. AT1a 경로 활성이 조절 이상을 보이면 고혈압, 심장비대 및 리모델링, 신장 손상, 혈관 기능장애 모델에서 중요한 기전 축으로 널리 활용되며, 따라서 Agtr1a는 심혈관·신장 생물학에서 경로를 해부하기 위한 흔한 표적입니다.

AT1a CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Agtr1a 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Agtr1a 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Agtr1a의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 AT1a 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 AT1a 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Agtr1a 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• AT1a 기능에 중요한 Agtr1a 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Agtr1a 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• AT1a CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 AT1a CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Agtr1a 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  AT1a HDR 플라스미드 (m) 및 AT1a HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Agtr1a 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Agtr1a 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.