ATP13A3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-413173

Visão geral

ATP13A3 codifica uma ATPase do tipo P5 implicada na homeostase de cátions e no tráfego de membranas dentro do sistema endolisossomal, contribuindo para a regulação do transporte vesicular e para a integridade dos compartimentos intracelulares. Ao influenciar gradientes iônicos e a função de organelas, a ATP13A3 pode afetar respostas celulares ao estresse, adaptação metabólica e processos de sinalização ligados à dinâmica de membranas. Alterações na atividade da ATP13A3 têm sido associadas à biologia cardiovascular e vascular pulmonar, incluindo associações genéticas relatadas na hipertensão arterial pulmonar, o que sustenta sua relevância para estudos de remodelamento vascular e função de células endoteliais. Sua expressão e o papel proposto na manutenção da homeostase celular também a tornam pertinente para investigar mecanismos de proliferação, sobrevivência e sinalização dependente de transporte.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ATP13A3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ATP13A3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ATP13A3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ATP13A3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ATP13A3.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ATP13A3 para a investigação da sinalização de ATP13A3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ATP13A3 críticos para a função ATP13A3
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ATP13A3 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo ATP13A3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo ATP13A3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ATP13A3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo ATP13A3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR ATP13A3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ATP13A3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ATP13A3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.