ATAD1 Plasmide Double Nickase (h): sc-413720-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ATAD1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ATAD1 Double Nickase Plasmid (h) e il ATAD1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ATAD1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ATAD1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-413720-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ATAD1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-413720-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ATAD1 (proteina 1 contenente un dominio AAA della famiglia delle ATPasi) è un’ATPasi AAA+ ancorata alla membrana che si localizza principalmente sulla membrana esterna del mitocondrio, dove supporta il controllo di qualità proteico estraendo proteine tail-anchored mal localizzate o bloccate e coordinandone il turnover. Attraverso un rimodellamento dipendente dall’ATP e il dialogo con le vie ubiquitina–proteasoma, ATAD1 contribuisce a mantenere la proteostasi mitocondriale, l’integrità dell’organello e l’omeostasi cellulare in condizioni di stress proteotossico o metabolico. L’alterazione della sorveglianza dipendente da ATAD1 può perturbare la dinamica mitocondriale e la funzione bioenergetica, collegando questo fattore a reti più ampie di risposta allo stress che influenzano la sopravvivenza e la differenziazione cellulare. Modifiche dell’attività di ATAD1 e variazioni del numero di copie sono state studiate nel contesto della biologia tumorale e di fenotipi neurodegenerativi in cui la disfunzione mitocondriale è una caratteristica centrale.
ATAD1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ATAD1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ATAD1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ATAD1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ATAD1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.