ASCC1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-417767

概要

ASCC1（activating signal cointegrator 1 complex subunit 1）は、転写制御およびゲノム維持に関与する核内因子であり、RNAポリメラーゼII依存性の遺伝子発現と連動するASC-1/ASCC共活性化因子複合体の一部として機能します。ASCC1は、遺伝毒性ストレスに対する細胞応答やDNA修復関連プロセスの調整に関与することが示されており、ストレス条件下で適切な細胞周期進行とプロテオスタシス（タンパク質恒常性）を支える役割を担います。ASCC1機能の破綻は神経筋疾患様の表現型と関連づけられており、分化した細胞における組織恒常性および遺伝子発現プログラムの維持に不可欠な役割を持つことと整合的です。そのためASCC1は、転写、DNA損傷シグナル伝達、ならびにストレス応答性の制御ネットワークをつなぐ経路の中で研究されています。

ASCC1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるASCC1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ASCC1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ASCC1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ASCC1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ASCC1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ASCC1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ASCC1の機能に不可欠なASCC1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ASCC1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ASCC1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびASCC1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ASCC1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ASCC1 HDRプラスミド（h）および ASCC1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはASCC1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のASCC1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。