ARRDC3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405287-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ARRDC3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ARRDC3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ARRDC3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ARRDC3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ARRDC3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405287-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ARRDC3 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405287-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ARRDC3 (arrestin domain containing 3) codifica uma proteína adaptadora da família das α-arrestinas que regula o tráfego de receptores de membrana e a atenuação de sinais ao acoplar receptores ativados à endocitose dependente de ubiquitina. Por meio de interações com ligases de ubiquitina E3 da família NEDD4 e com componentes da maquinaria de triagem endossomal, a ARRDC3 contribui para o controle da renovação (turnover) de receptores e dos desfechos de sinalização a jusante, incluindo vias ligadas à regulação de GPCRs e de receptores de fatores de crescimento. Sua atividade tem sido associada a processos celulares como migração, homeostase metabólica e respostas ao estresse, que dependem de um ajuste preciso da abundância de receptores na superfície celular. Alterações na expressão ou na função de ARRDC3 foram relatadas em contextos relevantes para invasividade de células tumorais e fenótipos metabólicos, tornando-a um alvo útil para estudos mecanísticos de sinalização e tráfego.
ARRDC3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ARRDC3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ARRDC3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ARRDC3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ARRDC3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.