ArgBP2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405716-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ArgBP2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ArgBP2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ArgBP2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SORBS2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ArgBP2 Anticorpo (B-11): sc-514671
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ArgBP2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405716-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ArgBP2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405716-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SORBS2 codifica a ArgBP2, uma proteína adaptadora enriquecida em músculo estriado e outros tecidos mecanicamente ativos, que acopla a remodelação do citoesqueleto de actina à transdução de sinais. A ArgBP2 contém domínios SH3 que servem de plataforma para parceiros ricos em prolina e integra sinais provenientes de quinases e de complexos de adesão para regular a organização de fibras de estresse, a dinâmica das adesões focais e a arquitetura sarcomérica. Por meio de interações com reguladores do citoesqueleto e componentes de sinalização da família Abl, a SORBS2 contribui para vias que controlam a forma celular, a migração e a função contrátil. Alterações na expressão de SORBS2 ou na conectividade de suas redes têm sido associadas a fenótipos cardíacos e musculares e são estudadas no contexto de remodelamento relacionado a cardiomiopatias e de desregulação do citoesqueleto.
ArgBP2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SORBS2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SORBS2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SORBS2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SORBS2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.