ARFGAP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2): sc-403939-NIC-2
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ARFGAP1O plasmídeo de dupla Nickase (h2) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ARFGAP1 (h2) e o Plasmídeo Double Nickase ARFGAP1 (h22) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ARFGAP1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ARFGAP1 Anticorpo (C-4): sc-271303
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ARFGAP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403939-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O ARFGAP1 humano codifica a proteína ativadora de GTPase do fator de ADP-ribosilação 1, um regulador associado ao Golgi que acelera a hidrólise de GTP em pequenas GTPases da família ARF para coordenar o brotamento de vesículas e a dinâmica dos revestimentos. Ao modular o tráfego retrógrado dependente de COPI e o transporte entre endossomos e o Golgi, o ARFGAP1 contribui para a curvatura de membrana, a triagem de cargas e a manutenção da arquitetura do Golgi, conectando a sinalização de ARF a vias mais amplas de secreção e reciclagem. A desregulação do tráfego mediado por ARFGAP1 tem sido investigada em contextos nos quais a proteostase e o transporte de organelas estão alterados, incluindo mecanismos relacionados à neurodegeneração que envolvem transporte vesicular e processamento de proteínas. A edição gênica de ARFGAP1 possibilita estudos mecanísticos do controle da via de ARF, da biogênese de vesículas e da função do Golgi usando modelos de nocaute/knock-in, mapeamento de interações e ensaios de tráfego em sistemas de células humanas.
ARFGAP1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h2) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ARFGAP1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ARFGAP1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ARFGAP1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ARFGAP1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.