apoC-III CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-419165

概要

マウスApoc3はアポリポタンパク質C-III（apoC-III）をコードしており、apoC-IIIは分泌型の小型アポリポタンパク質として、トリグリセリドに富むリポタンパク質の代謝およびクリアランスを調節することで、血漿中トリグリセリド恒常性を制御する。apoC-IIIは、リポタンパクリパーゼ依存的な脂肪分解や肝臓での取り込み経路に影響を与え、VLDLやカイロミクロン残渣の処理と、それに続く脂質フラックスを規定する。これらの過程を通じて、Apoc3の活性は全身のエネルギーバランスや、脂質異常症に関連する表現型と結び付いた炎症シグナル伝達とも交差する。apoC-III量の変動は、高トリグリセリド血症、動脈硬化感受性、ならびに心代謝リスク機構の研究において、分子レベルの指標として広く用いられている。

apoC-III CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるApoc3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Apoc3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Apoc3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、apoC-IIIタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、apoC-IIIシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Apoc3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• apoC-IIIの機能に不可欠なApoc3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Apoc3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• apoC-III CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびapoC-III CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Apoc3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  apoC-III HDRプラスミド（m）および apoC-III HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはApoc3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のApoc3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。