apoC-I CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-419163

概要

Apoc1はアポリポタンパク質C-I（apoC-I）をコードしており、apoC-Iは分泌型の小さなアポリポタンパク質です。HDLおよびVLDL粒子に結合し、脂質輸送やリポタンパク質リモデリングを調節します。マウスでは、apoC-Iが受容体との相互作用や、循環リポタンパク質経路におけるリパーゼ依存的な処理に影響することで、中性脂肪（トリグリセリド）に富むリポタンパク質のクリアランスとコレステロール輸送のバランスに作用します。Apoc1の発現はマクロファージ系譜の細胞で高く、脂質の取り扱いに関連する自然免疫シグナル伝達プログラムの形成に関与し得ます。APOC1の機能異常は、動脈硬化に関連する炎症、代謝性脂質異常、ならびに神経炎症の文脈と関連づけられており、免疫代謝の機構研究における標的としての有用性を裏づけています。

apoC-I CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるApoc1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Apoc1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Apoc1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、apoC-Iタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、apoC-Iシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Apoc1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• apoC-Iの機能に不可欠なApoc1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Apoc1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• apoC-I CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびapoC-I CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Apoc1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  apoC-I HDRプラスミド（m）および apoC-I HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはApoc1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のApoc1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。