apoC-I Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419163

Descripción general

Apoc1 codifica la apolipoproteína C-I (apoC-I), una pequeña apolipoproteína secretada que se asocia con partículas de HDL y VLDL y modula el transporte de lípidos y la remodelación de lipoproteínas. En ratones, la apoC-I influye en el equilibrio entre la depuración de lipoproteínas ricas en triglicéridos y el tráfico de colesterol al afectar las interacciones con receptores y el procesamiento dependiente de lipasas dentro de la vía circulante de lipoproteínas. La expresión de Apoc1 está enriquecida en células del linaje macrófago y puede moldear programas de señalización de la inmunidad innata vinculados al manejo de lípidos. La biología desregulada de APOC1 se ha relacionado con inflamación relevante para la aterosclerosis, dislipidemia metabólica y contextos de neuroinflamación, lo que respalda su uso en estudios mecanísticos de inmunometabolismo.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO apoC-I (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Apoc1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Apoc1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Apoc1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína apoC-I.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Apoc1 para la investigación de la señalización de apoC-I, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Apoc1 críticos para la función de apoC-I
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Apoc1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido apoC-I CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido apoC-I CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Apoc1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR apoC-I (m) y el plásmido HDR apoC-I (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Apoc1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Apoc1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.