apoA Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404800-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- apoAO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase apoA (h) e o Plasmídeo Double Nickase apoA (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para LPA. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
apoA Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404800-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
apoA Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404800-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene humano LPA codifica a apolipoproteína(a) (apoA), uma glicoproteína de origem hepática que se associa covalentemente à apolipoproteína B-100 para formar a lipoproteína(a) [Lp(a)], uma partícula que conecta o transporte de lipídios a processos relacionados à coagulação por meio de seus domínios kringle semelhantes aos do plasminogênio. Variantes em LPA influenciam os níveis circulantes de Lp(a) e modulam vias envolvidas em proteólise extracelular, remodelamento da matriz vascular e sinalização inflamatória. Alterações na biologia de apoA/Lp(a) são usadas como contexto molecular para estudar mecanismos de aterotrombose e fenótipos vasculares associados a lipídios. Como resultado, LPA é um alvo comum em estudos de genômica funcional que examinam o metabolismo lipídico, respostas endoteliais e vias secretórias de hepatócitos.
apoA O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus LPA em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de LPA. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função LPA. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com LPA interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.