ANT1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400679-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ANT1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ANT1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ANT1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SLC25A4. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ANT1 Anticorpo (E-7): sc-518268
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ANT1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400679-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ANT1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400679-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC25A4 codifica a translocase de nucleotídeos de adenina 1 (ANT1), um transportador da membrana mitocondrial interna que troca ADP e ATP através da membrana mitocondrial para acoplar a fosforilação oxidativa à demanda energética citosólica. A ANT1 é essencial para a bioenergética mitocondrial, a manutenção do potencial de membrana e a regulação da transição de permeabilidade e da apoptose, o que a relaciona a respostas ao estresse e ao controle de qualidade mitocondrial. Alterações na função da ANT1 têm sido associadas a fenótipos neuromusculares e metabólicos, incluindo miopatias mitocondriais e vias relacionadas à cardiomiopatia, tornando-a um alvo importante para o estudo do metabolismo energético específico de tecidos. Em células humanas, a ANT1 também se integra a redes mais amplas de transportadores mitocondriais que moldam o equilíbrio redox e a sinalização por espécies reativas de oxigênio.
ANT1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SLC25A4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SLC25A4. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SLC25A4. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SLC25A4 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.