ANO1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401314-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ANO1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ANO1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ANO1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ANO1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ANO1 Anticorpo (C-5): sc-377115
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ANO1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401314-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ANO1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401314-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ANO1 (também conhecido como TMEM16A) codifica um canal de cloreto ativado por cálcio que regula a secreção de fluidos epiteliais, a excitabilidade da membrana e o tônus do músculo liso ao acoplar sinais intracelulares de Ca²⁺ ao fluxo de ânions. A atividade de ANO1 molda o transporte transepitelial, contribui para a sinalização sensorial e neuronal e interage com vias dependentes de cálcio que influenciam a regulação do volume celular e o potencial de membrana. Alterações na expressão ou na função de ANO1 têm sido associadas a distúrbios da secreção epitelial e da fisiologia das vias aéreas, e o gene é frequentemente estudado no contexto da biologia tumoral, em que o remodelamento de canais iônicos pode afetar a proliferação, a migração e o microambiente tumoral. Essas características tornam ANO1 um alvo útil para investigar a sinalização dependente de canais de cloreto e processos fisiológicos impulsionados por cálcio em células humanas.
ANO1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ANO1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ANO1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ANO1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ANO1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.