ANKRD5 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-408943-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ANKRD5O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ANKRD5 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ANKRD5 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ANKEF1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ANKRD5 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-408943-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ANKRD5 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-408943-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ANKEF1 codifica uma proteína contendo repetições de anquirina, associada à nomenclatura ANKRD5, uma arquitetura de domínios comumente ligada a interações proteína–proteína que organizam complexos multiproteicos no citoplasma e no núcleo. Embora ANKEF1/ANKRD5 permaneça caracterizada de forma incompleta, proteínas com repetições de anquirina frequentemente modulam a transdução de sinais, a organização do citoesqueleto e a degradação dependente de ubiquitina ao atuarem como plataformas (scaffolds) ou adaptadores. Estudos de expressão e genéticos implicaram esse locus em programas regulatórios que afetam o estado celular e respostas ao estresse, tornando-o relevante para investigações mecanísticas da organização de vias em células humanas. Pesquisas em andamento exploram possíveis associações com fenótipos relacionados a doenças por meio de conectividade de rede alterada, em vez de uma única atividade enzimática definida.
ANKRD5 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ANKEF1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ANKEF1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ANKEF1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ANKEF1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.