Plasmide Double Nickase (h) Androgen Receptor: sc-400026-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Androgen Receptor correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Androgen Receptor Double Nickase (h) et le plasmide Androgen Receptor Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant AR. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Androgen Receptor Antibody (441): sc-7305
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Androgen Receptor | sc-400026-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Androgen Receptor | sc-400026-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
L’AR humain code le récepteur des androgènes, un récepteur hormonal nucléaire activé par un ligand qui agit comme facteur de transcription en contrôlant des programmes impliqués dans la différenciation, la prolifération et l’homéostasie métabolique. Après liaison aux androgènes, l’AR se transloque dans le noyau et se fixe sur des éléments de réponse aux androgènes, tout en coordonnant l’action de remodelateurs de la chromatine et de co‑régulateurs afin de façonner une expression génique dépendante du contexte. La signalisation de l’AR s’entrecroise avec les réseaux PI3K/AKT, MAPK et de réponse aux dommages de l’ADN, influençant le contrôle du cycle cellulaire et l’adaptation au stress. Une activité de l’AR dérégulée et des variants altérés du récepteur sont impliqués dans des phénotypes dépendants des androgènes et font l’objet d’études approfondies dans la biologie du cancer de la prostate et les troubles liés au système endocrinien.
Androgen Receptor Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus AR dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de AR. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de AR. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de AR.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.